[DNA sequencing] 생어 염기서열 분석

[DNA sequencing] 생어 염기서열 분석 Start

BioinformaticsAndMe

Sanger sequencing

---

: Sanger sequencing은 영국 생화학자 Fred Sanger(프레드 생어)와 그의 동료들이 1977년에 개발한 DNA 시퀀싱 방법

: 시험관 DNA 복제 중에 DNA 사슬을 종결시키는 'dideoxynucleotide termination method'에 기반

: 휴먼게놈프로젝트에서 상대적으로 작은 DNA 조각들을 시퀀싱하기 위해 사용됨

: 최근, NGS 분석으로 많이 대체 되었지만, 여전히 500bp 이상의 긴 염기서열 분석을 위해, cloning, PCR 분야 등에서 생어 시퀀싱 이용

Sanger sequencing 구성 요소

---

ㄱ) DNA template

→ 시퀀싱 될 DNA 주형

ㄴ) DNA 중합 효소(DNA polymerase enzyme)

→ DNA를 합성하며 연장해나감

ㄷ) 프라이머(Primer)

→ 방사성 표지 프라이머를 제작해, DNA Polymerase의 '스타터'로서 역할

ㄹ) 4개의 Deoxynucleotides(dNTP)

→ dATP, dTTP, dCTP, dGTP

ㅁ) 4개의 Dideoxynucleotides(ddNTP)

→ ddATP, ddTTP, ddCTP, ddGTP

→ ddNTP가 끼어들 때 복제를 멈추며, 다양한 길이의 DNA 가닥들이 합성됨

# 생어 시퀀싱 실험 영상

#Reference

1) https://www.khanacademy.org/science/high-school-biology/hs-molecular-genetics/hs-biotechnology/a/dna-sequencing

2) https://www.illumina.com/science/technology/next-generation-sequencing/ngs-vs-sanger-sequencing.html

3) https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%83%9D%EC%96%B4_%EC%97%BC%EA%B8%B0%EC%84%9C%EC%97%B4_%EB%B6%84%EC%84%9D

4) https://www.youtube.com/watch?v=FvHRio1yyhQ

5) https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5141512&cid=60266&categoryId=60266

[DNA sequencing] 생어 염기서열 분석 End

BioinformaticsAndMe